Amyloid Fibril Formation - Dye Detection and Effects of Lipids
Doctoral thesis, 2017
atomic force microscopy
fluorescence
Alzheimer’s disease
YOYO-1
amyloid fibrils
lipids
linear dichroism
FRET
circular dichroism
kinetics
Protein aggregation
insulin
thioflavin-T
Author
David Lindberg
Chalmers, Biology and Biological Engineering, Chemical Biology
Detection of amyloid-beta fibrils using the DNA-intercalating dye YOYO-1: Binding mode and fibril formation kinetics
Biochemical and Biophysical Research Communications,;Vol. 469(2016)p. 313-318
Journal article
Steady-state and time-resolved Thioflavin-T fluorescence can report on morphological differences in amyloid fibrils formed by A beta(1-40) and A beta(1-42)
Biochemical and Biophysical Research Communications,;Vol. 458(2015)p. 418-423
Journal article
David J. Lindberg, Emelie Wesén, Johan Björkeroth, Sandra Rocha & Elin K. Esbjörner - Lipid membranes catalyse the fibril formation of the amyloid-β (1-42) peptide through lipid-fibril interactions that reinforce secondary pathways
Basic, A.; Lindberg, D. J.: Limé, F.; Jageland, P.; Palmlöf, M. & Esbjörner, E. K. - Effect of Alcohols on Insulin Amyloid Formation at Moderately Acidic pH.
Min avhandling handlar om att på en grundvetenskaplig nivå förstå hur amyloida fibriller bildas. Jag har använt mig av biokemiska och biofysikaliska metoder för att undersöka hur bildandet går till, vilka mekanismer som styr och hur olika molekyler påverkar processen. Jag har också studerat två fluorescerande färgämnen, thioflavin-T och YOYO-1, som kan användas för att experimentellt detektera amyloida fibriller och deras egenskaper. Thioflavin-T är ett klassiskt använt amyloid-färgämne, men jag har utvecklat dess användningsområde, samt bidragit till en bättre förståelse kring dess ljusemitterande egenskaper. YOYO-1 är ett nytt amyloid-färgämne som tidigare mestadels använts för att färga in DNA-molekyler. Vidare har jag studerat hur lipidmembran påverkar bildandet av amyloida fibriller av Aβ. Jag har visat att membran med den i hjärnan vanligast förekommande lipidhuvudgruppen (PC), katalyserar bildandet av amyloida Aβ-fibriller. Jag har också utvecklat en ny metod för att studera lipid-fibrill-interaktioner, baserad på fluorescensenergiöverföring (FRET). Slutligen har jag också studerat amyloidfibrillbildning av det blodsockerreglerande proteinet insulin. När insulin tillverkas i stor skala industriellt bildas aggregat i utrustningen som används för upprening. Jag har visat att man genom att optimera pH och genom tillsatts av lågmolekylära alkoholer som etanol i reningssteget kan minska fibrillbildningen för insulin väsentligt.
Subject Categories
Biochemistry and Molecular Biology
Biophysics
Medical Biotechnology (with a focus on Cell Biology (including Stem Cell Biology), Molecular Biology, Microbiology, Biochemistry or Biopharmacy)
ISBN
978-91-7597-556-6
Doktorsavhandlingar vid Chalmers tekniska högskola. Ny serie: 4237
Publisher
Chalmers
KA-salen, Kemigården 4
Opponent: Daniel Otzen, Aarhus University, Denmark